梭菌疾病是一種古老的疾病,多年來主要發(fā)生在羊群中,是羊非常重要的一種疾病。牛梭菌病和羊梭菌病的病原特性非常相似。近幾年隨著養(yǎng)殖規(guī)模增大、密度增加、疫苗注射等各種外界誘因,造成牛梭菌疾病在牧場頻繁發(fā)生,才引起牧場高度重視。
梭菌性疾病是由多種厭氧性芽孢梭菌經(jīng)過多種途徑感染引起多種動物和人發(fā)病的一類急性(發(fā)病特別急)、中毒性(由毒素引起)、散發(fā)性(在牧場中不會造成接觸性感染)、致死性(一旦發(fā)生100%死亡)、非接觸性傳染病的總稱。通常稱羊梭菌疾病或牛梭菌疾病。
一、牛梭菌病分類
根據(jù)感染途徑、臨床表現(xiàn)不同,牛的梭菌疾病可分為以下三類:
1.經(jīng)傷口感染引起的牛局部氣性水腫、喘氣
(1)腐敗梭菌引起的惡性水腫,是產(chǎn)后牛最容易發(fā)生的一種急性死亡性疾病。
(2)氣腫疽梭菌引起的氣性壞疽,主要發(fā)生在成年牛、青年牛的腿部、臀部,又叫黑白病,觸診有摩擦音。
(3)A型諾維氏梭菌引起的水腫。
(4)A型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的氣性壞疽,在成年牛中不多見,主要發(fā)生在犢牛。
(5)溶組織梭菌引起的氣性壞疽。
2.經(jīng)消化道感染引起犢牛腸毒血癥及紅尿病
(1)A、B、C、D、E型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起1月齡到周歲的犢牛腸毒血癥。其中,最容易發(fā)生的是A型、C型和D型。
(2)D型諾維氏菌主要引起出生7天內(nèi)的犢牛血紅素尿(紅尿?。?,該病在規(guī)?;霎?dāng)發(fā)生比例不高。
3.經(jīng)毒素污染的食物引起人和動物的食物中毒
(1)主要由A型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起。
(2)肉毒梭菌。
二、牛梭菌病共同特點
1.發(fā)病機理相同。均由外毒素致病,通過傷口或消化道感染細菌繁殖后產(chǎn)生毒素,經(jīng)過血液循環(huán)進入全身、大腦、心血,引起一系列中毒癥狀。
2.免疫機理相同。以體液免疫為主,一旦發(fā)病,病牛早期可以用高免血清/抗毒素血清進行治療。
3.潛伏期、病程均較短。一般情況下發(fā)病快的6~12小時死亡,大部分不超過36小時死亡。發(fā)病快,死亡也較快。
4.死前均沒有特殊癥狀。可能早晨正常、晚上死亡,或晚上正常、早晨死在圈中,看不到任何癥狀。但死亡后會出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,如眼球突出、耳朵向后、四肢僵直、角弓反張等。
5.均有發(fā)病誘因。在了解和診斷梭菌病的主要誘因時,需要了解發(fā)病歷史,如近期是否打過疫苗、是否做過手術(shù)、是否有其他外傷感染、死亡犢牛是否采食過量造成消化不良而引起等。
6.散發(fā)、非接觸性傳播。每過一段時間死一頭牛,散發(fā)性是特點。
7.毒素檢測是最主要也是最準確的確診依據(jù)。
三、牛梭菌病的危害及發(fā)病現(xiàn)狀
近幾年,各個牧場都非常重視牛的梭菌病,雖然其發(fā)病率不高,但致死率很高,一年累計下來損失很大。
1.牛梭菌病分布廣,幾乎所有的牧場都可能發(fā)生,因為牛的腸道、牛舍環(huán)境、糞便、土壤中都可能帶細菌芽孢,所以梭菌病又稱為土源性傳染病。特別是在陰雨連綿以及出現(xiàn)洪澇災(zāi)害時,芽孢一旦被沖出來污染飼草料后很容易爆發(fā)梭菌病。
2.散發(fā),但致死率很高。
3.疫苗是目前唯一有效的預(yù)防手段。
4.多種病原體可導(dǎo)致人感染發(fā)病,危害人體健康與食品安全,如A型魏氏梭菌可引起人傷口感染也可造成牛奶食品污染。在牧場一定要佩戴手套,手指頭出現(xiàn)傷口后一定要消毒,防止A型魏氏梭菌引起氣性壞疽。
四、牛梭菌病防控存在的問題
1.是否使用疫苗,舉棋不定。目前基本上不管大小型牧場都在使用梭菌疫苗。
2.發(fā)病誘因比較多,難以管控。這是一個普遍存在的問題。
3.牧場現(xiàn)場診斷存在不確定性。如急性死亡的不一定是由梭菌引起,需要根據(jù)其他癥狀共同進行鑒別。梭菌病主要是在現(xiàn)場根據(jù)流行病學(xué)、死亡時間、剖解變化等初步診斷。如果送檢,結(jié)論存在一定的不確定性,因為送檢的病料、檢測方法、檢測目標等都會存在差異。
4.對于動物的梭菌病尚沒有行業(yè)認可的快速檢測方法。目前能使用的方法只有兩種:第一種是快速鏡檢,盡快采集死亡牛的脾臟、肝臟或水腫液體、組織,檢測是否有腐敗梭菌,其他梭菌無效;第二種是PCR方法,檢測組織液中的毒素進行診斷。
5.疫苗效果評價體系還有待建立。我國目前沒有疫苗抗體檢測方法,注射完梭菌疫苗后2~3周抗體水平達到30%為合格。希望盡快建立疫苗效果評價體系,為疫苗免疫提供技術(shù)支撐。
6.新型疫苗研發(fā)比較滯后?,F(xiàn)在使用的疫苗是全菌體疫苗,未來的疫苗一定是類毒素、毒素、毒素亞單位疫苗。每一種梭菌疾病的主要毒素已經(jīng)確定,克隆毒素后通過原核或真核表達,產(chǎn)生的亞肝疫苗、毒素亞肝疫苗更有針對性、更安全、效果更好。
五、犢牛產(chǎn)氣莢膜梭菌(魏氏梭菌)毒血癥
1.病原特性
(1)形態(tài)特征:G+帶莢膜單在、兩端鈍圓大桿菌。
(2)培養(yǎng)特征:專性厭氧,在羊鮮血平板上菌落呈“雙溶血環(huán)”。
(3)存在部位:牛腸道、糞便、環(huán)境、土壤中,主要是芽孢。死亡后偶見肝、脾中存在。
(4)致病性:A、B、C、D、E型產(chǎn)氣莢膜梭菌均可致病,可分泌α、β、ε、ι毒素,其中A型含有α毒素,B型含有α、β、ε毒素,C型含有α、β毒素,D型含有α、ε毒素,E型含有ι毒素。ε毒素在胰蛋白酶作用下被激活,引起腸毒血癥,也就是說大部分犢牛死亡,出現(xiàn)碳水化物采食較多的,一般都是由ε毒素所引起。
(5)抵抗力:細菌芽孢可耐受高溫(90℃)和干燥,但對多種化學(xué)消毒劑敏感。氯制劑有效。
2.流行特點
(1)流行方式:散發(fā)、地方性、爆發(fā)。
(2)感染途徑:消化道感染。
(3)多發(fā)日齡與體況:1~16周齡犢牛均可發(fā)生。1~2月齡和斷奶后兩個階段高發(fā)。生長較快、攝乳量和采食量較多的肥壯犢牛如果出現(xiàn)急性死亡,首先懷疑梭菌。
(4)誘發(fā)因素:碳水化合物、蛋白質(zhì)飼料攝入過多(飽食)引起的消化不良;大腸桿菌、冠狀病毒感染;菌群失調(diào)。
3.診斷要點
(1)臨床與病史調(diào)查:發(fā)病牛的日齡、體況、死前癥狀(血便)、病程、免疫狀況。
(2)尸體剖檢:剖解前觀察到角弓反張,剖解后發(fā)現(xiàn)小腸(空腸段)漿膜和黏膜出血、壞死,腸液呈茶色帶血;腸系膜淋巴結(jié)顯著腫大、出血;腎水腫變形,切開后液體流出,心外膜出血,腦脊液增多。剖解疑似梭菌病的犢牛,除了觀察死亡后的臨床尸體表現(xiàn)外,重點觀察腸道和腎臟。
(3)實驗室診斷:①毒素測定:小腸內(nèi)容物送檢(20mL,12小時內(nèi)),檢測毒素。方法:小鼠或家兔靜脈注射,毒素中和試驗。②肝臟組織或脾臟組織進行PCR、熒光抗體檢測。③腸內(nèi)容物PCR檢測毒素,這是最可靠的一種方法。
(4)鑒別診斷:1~16周齡犢牛一旦出現(xiàn)死亡,均與梭菌病有關(guān)。如李氏桿菌性腦炎,大腸桿菌性腦炎,腸球菌性腦炎,IBR-腦炎型;冠狀病毒腹瀉、沙門氏菌性腸炎、BVD-血便。
4.防疫要點
(1)疫苗接種:牛梭菌多聯(lián)滅活菌苗(六聯(lián)九防)。干奶期注射一次,防止出現(xiàn)難產(chǎn);產(chǎn)前1個月加強一次。犢牛3~4月齡注射一次,防止發(fā)病。
(2)發(fā)病治療:可以使用抗血清,但價格較高,而且量不多。
六、孕牛惡性水腫
1.病原特性:腐敗梭菌
(1)形態(tài)特征:G+無莢膜芽孢梭菌。死亡牛肝或羊肝表面觸片染色鏡檢呈長絲狀;肉湯培養(yǎng)物呈單在芽孢居中橢圓形桿菌。
(2)培養(yǎng)特征:一般不做培養(yǎng),顯示器快速診斷即可。如果培養(yǎng),在LB血平板上呈“紐扣狀”,邊緣呈放射狀菌落。
(3)存在部位:腸道、環(huán)境、土壤,病死牛肝、脾、腹水中。病死牛的肝臟、脾臟中可以檢測到細菌,但必須是夏天死亡6小時內(nèi)、冬天死亡12小時內(nèi)檢測。
(4)致病性:可分泌α、β、γ、δ這4種外毒素,其中α毒素為耐氧的溶血素,是主要毒素,可致宿主細胞壞死、溶解。
2.流行特點
(1)易感牛:懷孕牛、成母牛。
(2)傳染途徑:主要通過傷口感染,如助產(chǎn)、免疫注射、治療、手術(shù)、胃腸道損傷。
(3)發(fā)病誘因:難產(chǎn)助產(chǎn)時消毒不嚴,助產(chǎn)后未及時使用抗生素;分娩時地面環(huán)境衛(wèi)生不良導(dǎo)致傷口感染。
3.診斷要點
(1)病史及尸體變化:創(chuàng)傷史。突然死亡,死前無任何癥狀(區(qū)分牛出敗,牛在死前一定有癥狀,而且一定會出現(xiàn)體溫升高、呼吸加快)。死后局部炎性水腫,特別是產(chǎn)道、肛門周圍、臀部、大腿有水腫或氣腫,切開后流出污紅色滲出液,尸體易腐敗,但無迅速軟化及天然孔出血(區(qū)別炭疽)。
(2)實驗室診斷:肝表面觸片瑞特氏染色鏡檢最準確,染色后發(fā)現(xiàn)晶體即可確診。另外,抽取局部水腫液和肝組織進行PCR檢測,檢出毒素種類。肝組織分離培養(yǎng)(12小時內(nèi)冷藏送檢)一般不做。毒素致病力測定,病料和培養(yǎng)物小鼠腹腔注射。肝組織熒光抗體檢測。(3)鑒別診斷
炭疽:尸體變化(尸僵不全、天然孔出血、血凝不良),耳組織涂片鏡檢,帶莢膜、竹節(jié)狀兩端平直的大桿菌。牧場很少發(fā)生,但發(fā)生洪澇災(zāi)害或周邊牧場發(fā)生某些炭疽病例時,需要重點關(guān)注,一般比較容易分辨。
牛出?。哼\輸應(yīng)激、氣候變化或其他誘因,死前體溫升高41℃以上,極度呼吸困難,持續(xù)至少24~36小時。鼻腔流出帶泡沫鮮血,主要由肺臟出血引起。心血涂片可見兩級濃染巴氏桿菌。
氣腫疽:肌肉豐滿的局部如腿部、大腿部出現(xiàn)氣性海棉狀腫脹。PCR檢測,注射器吸0.5~1毫升生理鹽水注射進去再抽出來,可以測定局部是否含毒素。
急性酸中毒、低鈣血癥、急性酮?。簢a(chǎn)期孕牛及新產(chǎn)牛多發(fā)。使用碳酸氫鈉、葡萄糖酸鈣、葡萄糖靜脈注射有效。
4.防疫要點
(1)免疫接種:同前。所有梭菌疫苗接種都一樣。
(2)避免外傷:助產(chǎn)時衛(wèi)生消毒,術(shù)后及時使用抗生素,免疫注射時一定要做好針頭衛(wèi)生。建議一個針頭注射一針。
(3)環(huán)境控制:牛舍、產(chǎn)房的衛(wèi)生與消毒。(4)早期治療:可以采用大劑量青霉素靜脈肌注,但效果甚微。
5.人的感染
根據(jù)國外文獻報道,腐敗梭菌可引起人的胰腺炎、壞死性腸炎、結(jié)腸癌等。牧場應(yīng)做好牛舍糞污清除及無害化處理,關(guān)注公共衛(wèi)生安全。
七、青年牛氣腫疽及惡性水腫
1.病原特性
主要是氣腫疽梭菌、A型諾維氏菌、A型魏氏梭菌,都會引起青年牛局部氣腫和壞疽。
(1)形態(tài)特征:均為革蘭氏陽性厭氧芽孢桿菌,無莢膜(A型魏氏梭菌有莢膜)。
(2)存在部位:環(huán)境、土壤、糞便、腸道中。死后存在于肝、脾中。
(3)致病性:可產(chǎn)生α、β、γ、δ、ε等不同的8種毒素。氣腫疽含前4種,A型魏氏梭菌含α毒素,對小鼠、豚鼠、家兔均有致病力,其中氣腫疽梭菌對小鼠致病力弱,對家兔不致病。
2.流行特點
(1)通過傷口感染。(2)多發(fā)于青年牛,以2歲下多發(fā)。氣腫疽多發(fā)于肉牛和放牧牛。
3.診斷要點
(1)了解皮膚外傷史,確認有無傷口。
(2)臨床特征:氣腫疽病程比惡性水腫稍長,持續(xù)2~3天。病牛死前表現(xiàn)體溫升高到41℃以上,出現(xiàn)瘸腿跛行、渾身發(fā)抖,有時全身劇烈抽搐。局部肌肉(大腿、臂部、頸部、胸部、腹下)出現(xiàn)氣性腫脹(捻發(fā)音),組織壞死呈紫色(黑腿病、氣性壞疽)。
(3)病理變化:切開腫脹部位后,流出黃色帶氣泡的膠樣液體,切面呈海綿狀。
(4)確診需要進行病變組織、肝、脾臟PCR檢測或熒光抗體檢測。
(5)病料分離培養(yǎng)、病料和培養(yǎng)物動物接種(小鼠、豚鼠、家兔同時注射)一般不做。
4.防疫要點
(1)免疫接種牛梭菌多聯(lián)滅活苗。
(2)防止牛只出現(xiàn)外傷。
八、總結(jié)
牛梭菌性疾病在牛場中雖然不構(gòu)成流行,但因致死率較高而給牧場帶來一定的危害。是否接種疫苗需要根據(jù)牧場該病的歷年發(fā)生情況來定。發(fā)病率累計較高的情況下,疫苗接種是當(dāng)前唯一有效的防控措施。
牧場是否存在梭菌性疾病的風(fēng)險,應(yīng)以臨床病例診斷和實驗室確診病例數(shù)來評估疾病的存在。
作為科研單位和高校,建立快速準確的診斷方法、疫苗效果評價體系是今后科研的主攻方向。而研發(fā)新型的疫苗是今后疫苗廠家的主攻方向。
(本文根據(jù)天康制藥主辦的“冬季牛呼吸道及梭菌病防控專場”專家講課內(nèi)容整理)