在信得第四屆中國祖代種禽及大型父母代企業(yè)技術(shù)研討會上， 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院趙鵬教授以《雞傳染性貧血的危害及其防控》為主題，向與會行業(yè)同仁分享了雞傳染性貧血的危害和防控要點，以下是趙鵬老師的現(xiàn)場分享：
    今天我主要從“雞傳染性貧血病毒的流行與致病性”、“雞傳染性貧血病毒共感染的危害”以及“雞傳染性貧血的防控要點與新措施”三個方面向大家分享《雞傳染性貧血的危害及其防控》。

    一、雞傳染性貧血病毒流行與致病性

    傳貧作為典型的雞免疫抑制病、垂直傳播性疾病，既可以水平傳播，也可以垂直傳播，還可以通過疫苗污染傳播。無論垂直傳播還是水平傳播，傳貧的危害都比較嚴(yán)重。我們在通過雞胚接種的方式模擬傳貧垂直傳播的五次實驗中都發(fā)現(xiàn)，有垂直傳播的多數(shù)SPF雞群養(yǎng)不到一周便會死掉。此外，一些沒有傳貧母源抗體或母源抗體很低的雞，傳貧的水平傳播危害同樣很大。
    傳貧發(fā)現(xiàn)的歷史與疫苗污染也密切相關(guān)，它是一種典型的因疫苗污染而被發(fā)現(xiàn)的病毒。日本報道給雞進(jìn)行疫苗免疫后SPF雞出現(xiàn)了貧血，由此發(fā)現(xiàn)了一個新的病毒，即我們現(xiàn)在說的雞傳染性貧血病毒，此后，在我們國內(nèi)也發(fā)現(xiàn)和報道了活疫苗中的傳貧污染。

    傳貧之所以能夠流行如此廣泛，與它超強(qiáng)的傳播能力密不可分的。一些科研專家在動物房中的老鼠、貓、狗等動物的糞便里檢測到的傳貧病毒全基因組與雞群中的病毒完全一致，這說明傳貧的基因組非常穩(wěn)定保守。很多人說，傳貧病毒進(jìn)來容易送走難，它的傳播能力和生存能力超強(qiáng)，這就導(dǎo)致傳貧非常難防。

    毫無疑問，傳貧在臨床上最典型的器官損傷是胸腺萎縮和骨髓黃染。胸腺萎縮，嚴(yán)重時感染雞的胸腺發(fā)育指數(shù)大概是正常雞的的1/4或1/3的水平，如果經(jīng)垂直傳播感染胸腺萎縮會更加嚴(yán)重，可能導(dǎo)致雞群整個免疫系統(tǒng)的嚴(yán)重?fù)p傷甚至崩潰，以致后期各種疫苗免疫效果都不理想。
    我們成功通過反向遺傳技術(shù)人工構(gòu)建了山東2015年傳貧強(qiáng)毒株SD15株的感染性克隆，這株感染性克隆攻毒后的SPF雞紅細(xì)胞壓積大約是20或19，一般認(rèn)為紅細(xì)胞壓積低于27時就屬于貧血，那么19-20就應(yīng)該屬于貧血比較嚴(yán)重了。

    近三年，我們也在某痘病毒活疫苗中鑒定到傳貧病毒的污染，我們也成功地構(gòu)建出了這個病毒的反向遺傳系統(tǒng)，證實這個毒株具有超強(qiáng)的致病性。在免疫了這個疫苗后，整個雞群在21天左右出現(xiàn)了嚴(yán)重的貧血，雞群的生產(chǎn)性能極差，紅細(xì)胞壓積大概在17左右。由此可見，如果疫苗有傳貧病毒的污染，疫苗使用效果將被極大抑制。而且，傳貧對機(jī)體的免疫抑制非常嚴(yán)重，一旦感染傳貧，雞群整個先天免疫水平都會處于很低水平，各種免疫器官萎縮或損傷，影響雞群健康。

    近年來，傳貧流行非常嚴(yán)重，比如有報道顯示，從全國17個省份，193個雞場的調(diào)研中發(fā)現(xiàn)，某區(qū)域的傳貧陽性率較高，甚至達(dá)到80%左右。很多雞群中雛雞傳貧病原的陽性率也在逐步提高，而且雞群的傳貧母源抗體不足并具有傳貧垂直傳播增加的傾向。
    二、雞傳染性貧血病毒共感染的危害

    不同雞免疫抑制病毒與雞傳染性貧血病毒共感染可能會增強(qiáng)其危害，所以我們要特別關(guān)注和提防。

    1.傳貧和雞馬立克病共感染對雞的影響

    ①對細(xì)胞壓積的影響：通過實驗數(shù)據(jù)我們看到，正常雞紅細(xì)胞壓積HCT值為29，符合國際普遍27以上的正常標(biāo)準(zhǔn)，傳貧單獨感染組HCT值是15，但是當(dāng)傳貧和馬立克兩個共染之后雞的紅細(xì)胞壓積是8.9，只有正常雞1/4 左右的水平。我們都知道，紅細(xì)胞不僅能運(yùn)輸氧還有很強(qiáng)的免疫功能，紅細(xì)胞壓積這么低，雞的免疫機(jī)能也會受影響。雖然雞到了21日齡有所緩和，但這兩種病毒共感染相對于傳貧單感染或者雞馬立克單感染以及正常的雞依然有很大差別。雖然28日齡、35日齡時有所恢復(fù)，但仍無法恢復(fù)到正常雞的水平，這就是共感染對紅細(xì)胞壓積也就是貧血的不良影響。
    ②對生長性能的影響。傳貧和雞馬立克兩種病毒單感染對生產(chǎn)性能有一定的影響，但兩種病毒共感染之后影響更大。比如到35日齡時，共感染組雞相對于正常雞平均體重相差了約70克，與單感染組相比體重相差了約20克，所以共感染對生產(chǎn)性能的影響非常明顯。
    ③對疫苗免疫后抗體的影響。我們評估了傳貧感染對四種疫苗免疫的影響，包括新城疫滅活苗，禽流感的 H5和H9以及傳染性法氏囊疫苗，毫無疑問共感染組與對照組有顯著性差異。對新城疫來講，正常的雞是7.32，共感染組是4.45。對H5亞型禽流感疫苗來講，正常的雞是7，共感染組是3.8；H9亞型禽流感疫苗正常雞是6，共感染組是3；法氏囊疫苗正常雞滴度是2441，共感染組是996。共感染的危害不僅與正常雞相比差異顯著，與單獨感染一種病毒的雞相比，共感染的危害也很明顯。
    傳貧為什么會導(dǎo)致馬立克疫苗免疫失敗？它對雞馬立克疫苗免疫有哪些影響？在沒有傳貧存在的情況下，比如在一次實驗中，CVI 988疫苗能夠?qū)?qiáng)毒攻毒提供95%的保護(hù)，但一旦有了傳貧，它的保護(hù)率就降到了54%。另外，傳貧還會影響疫苗免疫后雞的生長性能，免疫CVI988后有傳貧病毒的雞比沒有傳貧病毒的雞體重大概差了30克。此外，傳貧還影響免疫器官的發(fā)育，以胸腺為例，兩個組都免CVI 988，但一個組攜帶傳貧，一個組不攜帶傳貧，實驗證明，攻毒9天后攜帶傳貧的SPF雞胸腺發(fā)育指數(shù)是0.17，不攜帶傳貧的胸腺發(fā)育指數(shù)是0.39，發(fā)育指數(shù)值越小說明胸腺萎縮越嚴(yán)重。16天時這種差別更大，攜帶傳貧的胸腺發(fā)育指數(shù)是0.12，不攜帶傳貧的胸腺發(fā)育指數(shù)是0.50，也就是說攜帶傳貧病毒感染的雞胸腺萎縮到正常雞約1/4的水平。
    2.J亞群禽白血病和傳貧共感染對雞的影響

    ①對生長性能的影響。根據(jù)已有的報道和我們的最近研究進(jìn)展，J亞群禽白血病和傳貧共感染對雞的危害很大。從生長性能來講，兩個病毒共感染后，體重最低的永遠(yuǎn)是共感染組，體重大概比正常雞下降30%左右。另外，從7天到63天，監(jiān)測各種臟器的病毒復(fù)制情況來看，當(dāng)這兩個病毒共感染時，一種病毒會促進(jìn)另一種病毒在免疫器官和臟器中的顯著復(fù)制。
    ②對疫苗免疫的抑制和禽白血病凈化的影響。這兩種病毒的混合感染會增強(qiáng)對疫苗免疫的抑制作用。此外，我們通過雞胚共感染白血病和傳貧的模擬實驗中證實，共感染后死胚率最高，這就可以解釋為什么我們做凈化后可以顯著提高雞的孵化率，而攜帶傳貧病毒它的孵化率就很難提高。

    ③對病毒血癥的檢測和胎糞p27檢測的影響。我們檢測發(fā)現(xiàn)，傳貧跟白血病共感染之后，雞仍然是100%的病毒血癥，但對胎糞p27陽性率來講有一點變化，沒有像血液做病毒分離一樣有規(guī)律。

    ④傳貧和白血病通過雞胚共同垂直傳播后對下一代的影響。實驗研究發(fā)現(xiàn)前兩周對整個免疫器官會產(chǎn)生損傷，毫無疑問共感染對脾臟、法氏囊都有一定影響。另外，這兩個病毒通過雞胚垂直傳播之后，也會幫助另一個病毒在機(jī)體內(nèi)顯著增強(qiáng)復(fù)制。
    3.傳貧和腺病毒共感染對雞的影響

    2016 年我國出現(xiàn)安卡拉病后，我戲稱傳貧和腺病毒是咖啡和伴侶，它們離了誰都不香。比如，我們率先從某新城疫活疫苗中檢出傳貧和腺病毒的混合污染，花了很大的力氣把這兩個病毒純化出來，進(jìn)行重復(fù)模擬實驗。最后我們發(fā)現(xiàn)，單獨污染腺病毒的疫苗使用后并沒有像臨床上80%那樣的死亡率，但同樣的腺病毒和同樣的劑量，加上傳貧混合污染后的疫苗再使用，就出現(xiàn)了高達(dá)75%的死亡率，非常切合當(dāng)時臨床實際情況。
    三、雞傳染性貧血防控要點與新措施

    傳貧防控的要點——抗體是全世界的共識。幾十年來我們通過兩種途徑來解決抗體的問題，第一是疫苗免疫，第二是自然感染。在很長時間內(nèi)沒有商品化疫苗免疫的情況下，很多企業(yè)都是靠自然感染誘導(dǎo)獲得抗體。作為一個環(huán)境感染壓力很高的病毒，傳貧在養(yǎng)殖環(huán)境中無處不在，要想使它徹底凈化，我認(rèn)為現(xiàn)在的條件下難度很大、凈化成本非常高，性價比非常低，暫時還沒到那個階段。

    我們通常通過免疫或自然感染誘導(dǎo)后，再監(jiān)測種源的傳貧抗體滴度、整齊度、離散度，以及監(jiān)測下一代雛雞的母源抗體滴度、整齊度、離散度。我們希望抗體滴度越高越好，離散度越低越好。無論用什么方式實現(xiàn)了這個目標(biāo)，臨床上一般不會出現(xiàn)傳貧的問題。所以傳貧防控的核心一直是讓雞獲得足夠的高質(zhì)量的母源抗體，以此擋住傳貧的早期感染，如果能擋住早期感染，即使大日齡的雞再感染也會很容易產(chǎn)生傳貧抗體，不容易形成持續(xù)性帶毒或者垂直傳播，從而又容易產(chǎn)生新的抗體，形成新一輪的抗體循環(huán)。我們希望母源抗體能在傳貧最易感的時期保護(hù)雞群免于感染，以避免長期持續(xù)帶毒及形成垂直傳播的可能性。對于傳貧，無論是疫苗免疫還是自然感染誘導(dǎo)，我們希望抗體升上去后在整個產(chǎn)蛋期保持非常平穩(wěn)的狀態(tài)。
    我國目前沒有注冊的商品化國產(chǎn)疫苗，傳貧疫苗研制的難點有很多方面，一是我們沒有解決好病毒培養(yǎng)體系的問題，二是傳貧病毒非常穩(wěn)定，它不像其他病毒一樣隨著傳代增加而使毒性很快減弱，需要我們強(qiáng)化基礎(chǔ)研究加以解決。我們在進(jìn)行信得轉(zhuǎn)移因子-信必妥對傳貧的抑制實驗中發(fā)現(xiàn)，信得轉(zhuǎn)移因子對抗傳貧有一定效果，下面簡要介紹一下實驗結(jié)果。

    拋開抑制病毒感染而言，信得轉(zhuǎn)移因子對生長性能也有促進(jìn)作用。實驗中我們發(fā)現(xiàn)，使用了高劑量信得轉(zhuǎn)移因子的實驗組雞群，即便有傳貧感染體重仍然能夠接近正常SPF雞的水平。
    信得轉(zhuǎn)移因子之所以能抗病毒，一個重要因素是因為它能夠刺激先天抗病毒因素得到有效釋放。我們的研究證實，相對于不使用轉(zhuǎn)移因子的SPF雞，SPF雞使用轉(zhuǎn)移因子后干擾素、白介素、腫瘤壞死因子等均出現(xiàn)了上調(diào)，由此說明，信必妥能夠刺激抗病毒先天免疫因素得到有效釋放，特別是用了高劑量的轉(zhuǎn)移因子后干擾素呈現(xiàn)了高表達(dá)。
    對于可以抗抑制多種病毒的廣譜抗病毒蛋白MX蛋白，我們發(fā)現(xiàn)使用了信必妥后MX蛋白相對表達(dá)水平上調(diào)了3倍，我們原來做過的各種免疫增強(qiáng)劑都沒能達(dá)到這種效果。以前我們的實驗數(shù)據(jù)也表明，一旦 MX蛋白表達(dá)后，對戊肝病毒等也有很強(qiáng)的抑制作用。
    信得轉(zhuǎn)移因子對雞的細(xì)胞免疫也有明顯促進(jìn)作用，比如我們觀察到信必妥對代表細(xì)胞免疫水平的CD4/CD8比值有明顯的增加作用，表明促進(jìn)了細(xì)胞免疫水平，而且與香菇多糖聯(lián)合使用后效果更好。另外，我們觀察了轉(zhuǎn)移因子對多種器官發(fā)育的影響，包括法氏囊、肝臟、脾臟、胸腺等。我們知道傳貧感染后很嚴(yán)重的危害就是導(dǎo)致胸腺萎縮，通過對比發(fā)現(xiàn)，使用高劑量的轉(zhuǎn)移因子后，即使感染了傳貧強(qiáng)毒，雞群胸腺的發(fā)育基本仍接近于了空白組的水平。
    轉(zhuǎn)移因子對緩解傳貧感染的作用非常明顯。實驗表明，感染傳貧的雞經(jīng)高劑量轉(zhuǎn)移因子抑制后和正常的雞紅細(xì)胞壓積幾乎沒有差別，不僅如此，它還能夠抑制傳貧在體內(nèi)的復(fù)制。不僅在血液里邊，在肝臟、胸腺中信必妥對傳貧的復(fù)制也有顯著的抑制作用?？梢哉f，不管是低日齡還是高日齡，高劑量的轉(zhuǎn)移因子對傳貧都有非常明顯的抑制作用。