血液生理生化指標(biāo)是動物生理狀態(tài)和機(jī)體健康狀況最直觀的反映，而免疫指標(biāo)則體現(xiàn)了機(jī)體的免疫狀態(tài)和抗病力，這些都是獸醫(yī)臨床診斷疾病、防治疾病不可缺少的重要依據(jù)，也是生理學(xué)、免疫學(xué)、病理學(xué)等研究的重要參考指標(biāo)。研究榮昌豬不同性別的血液生理生化及免疫指標(biāo)的變化情況及其差異，確定榮昌豬血液生理生化及免疫指標(biāo)正常參考數(shù)據(jù)，對于進(jìn)一步探究榮昌豬的品種特性，促進(jìn)在畜牧生產(chǎn)和生物醫(yī)學(xué)研究上的開發(fā)利用有著重要的意義。目前，系統(tǒng)研究我國地方豬品種血液生理生化指標(biāo)特性的報道多見于小型豬，如五指山豬、巴馬香豬、合作豬、藏豬、滇南小耳豬等，也有太湖豬、清平豬、莆田黑豬、皖南花豬等其地方豬品種。王孝友等測定了1~4月齡榮昌豬仔血液生理生化指標(biāo)，并與國內(nèi)部分地方豬種和人進(jìn)行了比較。廖均華等曾測定了生長豬、妊娠和泌乳母豬、公豬的部分血液生理指標(biāo)。蔣茂成等曾測定了成年榮昌閹公、母豬，雙月齡仔豬的12項(xiàng)生化指標(biāo)。但目前7月齡以上成年榮昌豬種豬的血液生理生化及免疫指標(biāo)數(shù)據(jù)還明顯不足，有待進(jìn)一步完善。本研究通過對不同性別成年榮昌豬種豬血液生理生化及免疫指標(biāo)進(jìn)行測定分析，為榮昌豬進(jìn)一步作為實(shí)驗(yàn)動物提供可靠的基礎(chǔ)研究數(shù)據(jù)。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)動物
在重慶市畜牧科學(xué)院榮昌豬國家級資源保護(hù)場保種核心群中隨機(jī)選取7月齡以上成年榮昌豬種豬32頭。其中，種母豬20頭（妊娠期12頭，哺乳期8頭）：10~11月齡2頭，1~2年4頭，2年以上14頭；種公豬12頭，全部為已配種公豬：7~11月齡4頭，1~2年5頭，2年以上3頭。
1.2 飼料配方及營養(yǎng)成分
采用玉米-豆粕型日糧，飼料原料組成及營養(yǎng)成分見表1。
1.3 飼養(yǎng)管理及免疫程序
開放式豬舍，水泥地板。采用全價配合飼料，每日人工加料2次。試驗(yàn)豬自由采食，自由飲水。每日清掃圈舍2次，保持地面清潔。按豬場常規(guī)程序免疫，即每年2、3、8月分別免疫豬乙腦、豬瘟、豬偽狂犬疫苗。
1.4 血樣采集
用5 mL一次性注射器前腔靜脈取血4~5 mL，立刻向2mL EDTA.K2抗凝血真空管注入血液2mL，并顛倒混勻數(shù)次，用于血常規(guī)檢查；留有2~3mL非抗凝血的注射器倒置2~3 h后將上清轉(zhuǎn)入2 mL滅菌離心管中，1000×g離心20min取血清分裝并存于-20℃冰箱備用，用于生化和免疫指標(biāo)的測定。
1.5 測定指標(biāo)
血液生理指標(biāo)（13項(xiàng)）：白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、紅細(xì)胞平均體積（MCV）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量（MCH）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差（RDW-SD）、紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)（RDW-CV）、血小板（PLT）、血小板平均體積（MPV）、血小板壓積（PCT）和血小板分布寬度（PDW）。
血清生化指標(biāo)（12項(xiàng)）：谷丙轉(zhuǎn)氨酶 （ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、堿性磷酸酶（ALP）、葡萄糖（GLU）、尿素（UREA）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）和載脂蛋白AⅠ（APOA）。血清免疫指標(biāo)：免疫球蛋白GIgG）和免疫球蛋白M（IgM）。
1.6 測定方法
抗凝血送至重慶市榮昌縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，利用SYSMEX公司生產(chǎn)的全自動血液分析儀（Sysmex XT-2000i）測定各項(xiàng)血液生理指標(biāo)；血清利用日本日立公司生產(chǎn)的全自動生化儀（automatic biochemical analyzer， Hitachi 7020）常規(guī)操作測定各類生化和免疫指標(biāo)。
1.7 統(tǒng)計分析
應(yīng)用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，組間比較采用t檢驗(yàn)。結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
2 結(jié)果
2.1 榮昌豬血液生理指標(biāo)測定結(jié)果
由表2可知，榮昌公豬的RBC、HGB、HCT均高于榮昌母豬（P<0.01），而WBC正好相反（P<0.01）。榮昌豬其他生理指標(biāo)在性別間無顯著差異（P>0.05）。
2.2 榮昌豬血液生化指標(biāo)測定結(jié)果
由表3可知，榮昌公豬的血清ALB、堿性磷酸酶ALP和葡萄糖GLU均極顯著或顯著高于榮昌母豬（P<0.01 或 P<0.05），而血清ALT、APOAⅠ均極顯著和顯著低于榮昌母豬（P<0.01 or P<0.05）。榮昌豬其他生化指標(biāo)在性別間無顯著差異（P>0.05）。
2.3 榮昌豬血液免疫指標(biāo)測定結(jié)果
由表4可知，榮昌豬血清IgG、IgM在性別間無顯著差異（P>0.05） 。
3 討論
3.1 榮昌豬及其他豬種血液生理生化及免疫指標(biāo)
性別間的差異作為生物醫(yī)學(xué)研究的重要基礎(chǔ)指標(biāo)之一，豬的血液生理生化指標(biāo)受品種、年齡、性別、生理狀態(tài)和生活環(huán)境等因素的影響，具有一定的變異度。本研究測定的榮昌豬13項(xiàng)血液生理指標(biāo)中，MCV等9項(xiàng)在性別間無顯著差異，這與在藏豬、莆田黑豬、劍白香豬、五指山豬、合作豬、太湖豬中研究結(jié)果基本一致。另外，RBC、HGB、HCT和WBC 4項(xiàng)指標(biāo)在性別間有顯著差異，且前3項(xiàng)指標(biāo)榮昌公豬均極顯著高于榮昌母豬，后1項(xiàng)指標(biāo)榮昌母豬極顯著高于榮昌公豬。廖均華等比較成年榮昌公豬與空懷期母豬的RBC和HGB，結(jié)果與本研究相似。李波等測定了8~12月齡滇南小耳豬的血液生理指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)RBC、HGB和紅細(xì)胞壓積HCT在性別間也有顯著差異，但公豬低于母豬。而其他地方豬種在上述4個差異指標(biāo)上均未發(fā)現(xiàn)有性別差異。
本研究測定的榮昌豬12項(xiàng)血液生化指標(biāo)中，AST、UREA、LDL-C、TP、TC、TG、HDL-C 7項(xiàng)指標(biāo)無顯著的性別差異，而ALT、GLU、ALB、ALP、APOAⅠ 5項(xiàng)指標(biāo)存在顯著或極顯著的性別差異。與其他中國地方豬種比較，不同指標(biāo)在不同豬種中研究的結(jié)果并不一致：如TC在榮昌豬中未表現(xiàn)顯著的性別差異，這與在藏豬、五指山豬和安慶六白豬中研究結(jié)果一致，而在莆田黑豬、合作豬和皖南花豬中卻表現(xiàn)顯著的性別差異；ALP在榮昌豬中均表現(xiàn)出顯著的性別差異，榮昌公豬ALP極顯著高于榮昌母豬，這與在藏豬中研究結(jié)果一致，但在莆田黑豬、五指山豬和合作豬中未表現(xiàn)顯著的性別差異。
免疫球蛋白是存在于動物血液、組織液及其他分泌液中的一類具有抗體活性的球蛋白，通常分為五類：IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。其中，IgG是人和動物血清中含量最高的免疫球蛋白，是介導(dǎo)體液免疫的主要抗體。血清中IgG含量可以反映血清中抗體的主要部分，代表了機(jī)體體液免疫的狀態(tài)。IgM是初次體液免疫反應(yīng)中最早出現(xiàn)的免疫球蛋白，在感染初期發(fā)揮著先鋒免疫作用。本研究測定了成年榮昌豬血清IgG和IgM，發(fā)現(xiàn)2個指標(biāo)在性別間均無明顯差異。而盛晟等測定不同日齡皖南花豬血清IgG和IgM，發(fā)現(xiàn)母豬血清IgG在45d和90d大于公豬，而在0、30、180d時性別間均無明顯差異； 血清IgM在各日齡階段均有顯著的性別差異，母豬顯著大于公豬。
綜上所述，與國內(nèi)其他地方豬種相比，榮昌豬血液生理生化及免疫指標(biāo)在性別間的差異既有一致性又有差異性。這也進(jìn)一步表明榮昌豬既有地方豬種的共有特性，又有其獨(dú)特的品種特性。
3.2 榮昌豬血液生理生化指標(biāo)與小型豬及人類比較
由于具有體型較小、易于實(shí)驗(yàn)操作、易于微生物控制、飼養(yǎng)成本低等優(yōu)點(diǎn)，小型豬日益成為生命科學(xué)研究中的重要實(shí)驗(yàn)動物。我國擁有小型豬品系資源豐富，包含了2個資源品系、7個封閉群和2個近交培育系。與我國主要的小型豬相比，榮昌豬的WBC、MCV、MCH、ALB和TP測定平均值與封閉群五指山小型豬接近，RDW-CV測定平均值與近交系五指山小型豬接近，RBC、HGB、PDW、MPV、AST和ALB測定平均值與廣西巴馬小型豬接近，MCHC、ALT、TP和TC測定平均值與貴州小型豬接近，而HCT、PLT、UREA和GLU測定平均值均小于上述4個小型豬。研究表明，封閉群五指山小型豬、近交系五指山小型豬、廣西巴馬小型豬和貴州小型豬分別有8項(xiàng)、5項(xiàng)、9項(xiàng)、8項(xiàng)血液生理指標(biāo)處于人類血液生理正常參考指標(biāo)范圍內(nèi)，分別有6項(xiàng)、8項(xiàng)、6項(xiàng)、8項(xiàng)血液生化指標(biāo)處于人類血液生化正常參考指標(biāo)范圍內(nèi)。
本研究結(jié)果顯示，13項(xiàng)榮昌豬的血液生理指標(biāo)有7項(xiàng)的平均值處于人類血液生理正常參考指標(biāo)范圍內(nèi)，可比較的9項(xiàng)榮昌豬的血液生化指標(biāo)有4項(xiàng)的平均值處于人類血液生化正常參考指標(biāo)范圍內(nèi)。該結(jié)果說明榮昌豬和人的血液生理生化特性存在一定的相似性，可以應(yīng)用于比較醫(yī)學(xué)、藥物測試等方面的生物醫(yī)學(xué)研究。
4 結(jié)論
通過系統(tǒng)研究成年榮昌豬不同性別血液生理生化及免疫指標(biāo)的變化情況及其差異，確定了榮昌豬血液生理生化及免疫指標(biāo)的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，為探究榮昌豬的品種特性及其在畜牧生產(chǎn)和醫(yī)學(xué)研究上進(jìn)一步利用提供了參考。榮昌豬和人的血液生理生化特性存在一定的相似性，是理想的醫(yī)學(xué)研究用實(shí)驗(yàn)動物。
（重慶市畜牧科學(xué)院 白小青、張鳳鳴、張亮、陳英、涂志；農(nóng)業(yè)部養(yǎng)豬科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 白小青、張亮；重慶市養(yǎng)豬工程技術(shù)研究中心 白小青、張鳳鳴、張亮）
